單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)的核心在于高質(zhì)量單細(xì)胞懸液的制備，而香豬肝臟、卵巢、子宮、胰腺等器官因組織特性差異，傳統(tǒng)手動(dòng)處理易導(dǎo)致細(xì)胞活性低、雜質(zhì)多。借助單細(xì)胞懸液制備儀的標(biāo)準(zhǔn)化程序，可實(shí)現(xiàn)多器官組織的高效解離，為后續(xù)單細(xì)胞分析提供穩(wěn)定的樣本基礎(chǔ) —— 這份實(shí)驗(yàn)方案將詳解如何用儀器精準(zhǔn)完成香豬多器官單細(xì)胞懸液制備。
實(shí)驗(yàn)用儀器：
單細(xì)胞懸液制備儀 JX-CKSM-12WK
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>香豬-肝臟、卵巢、子宮、胰腺制備成單細(xì)胞懸液
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、連接儀器電源，打開(kāi)開(kāi)關(guān)，選好程序以備用。
2、消化酶和終止液提前用流動(dòng)自來(lái)水解凍，讓其混合更加均勻。
3、香豬解剖后，取出肝臟、卵巢、子宮、胰腺放入有類(lèi)器官緩沖液的培養(yǎng)皿中，放在冰上。
4、將選取的組織用類(lèi)器官緩沖液洗滌后，用眼科剪剪碎、放入2ml消化管中，加入1ml左右消化酶。(所有工具滅菌處理)
5、放到模塊上，選擇對(duì)應(yīng)程序，點(diǎn)擊運(yùn)行開(kāi)始。
6、時(shí)間結(jié)束后儀器自動(dòng)停止。
7、吸出消化好的懸液，立即鏡檢。
8、終止后，過(guò)濾單細(xì)胞懸液，離心棄上清，用基質(zhì)膠重懸，進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：
1、單細(xì)胞試劑盒要在-20℃低溫保存，使用時(shí)提前拿出來(lái)用涼水解凍，切記用溫?zé)崴?/span>
2、注意不要清洗單細(xì)胞懸液次數(shù)或時(shí)間太長(zhǎng)，導(dǎo)致細(xì)胞損失。
實(shí)驗(yàn)效果：
左圖為：肝臟，右圖為：胰腺
左圖為：卵巢 ，右圖為： 子宮
左圖為：子宮 ，右圖為：子宮
通過(guò)單細(xì)胞懸液制備儀的程序化操作，香豬肝臟、卵巢、子宮、胰腺組織能快速轉(zhuǎn)化為高活性單細(xì)胞懸液，既減少了手動(dòng)操作的誤差，又通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化流程保障了不同器官樣本的一致性。遵循本方案，可高效獲得符合單細(xì)胞測(cè)序要求的懸液，為解析香豬多器官細(xì)胞異質(zhì)性研究提供可靠的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，讓單細(xì)胞制備從 “經(jīng)驗(yàn)依賴(lài)” 走向 “儀器標(biāo)準(zhǔn)化”。
