還在為組織剪不碎、消化控不好、細(xì)胞死得多、懸液團(tuán)塊多發(fā)愁？傳統(tǒng)手工制備小鼠肝臟、肺臟單細(xì)胞懸液，費(fèi)時(shí)費(fèi)力、重復(fù)性差、細(xì)胞活率低，直接拖慢單細(xì)胞測(cè)序、流式分析、原代培養(yǎng)等關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)。今天結(jié)合小鼠肝臟 + 肺臟實(shí)操案例，帶你看懂：一臺(tái)全自動(dòng)單細(xì)胞懸液制備儀，如何把復(fù)雜組織解離變成省心、穩(wěn)定、高活率的標(biāo)準(zhǔn)化流程。
單細(xì)胞懸液制備儀裝機(jī)圖
01、傳統(tǒng)手工制備的3大痛點(diǎn)
1.操作繁瑣耗時(shí)長(zhǎng)剪碎、吹打、消化、終止、過(guò)濾、洗滌全手動(dòng)，一人做多樣本易出錯(cuò)，全程至少 1–2 小時(shí)。
2.細(xì)胞活率與得率不穩(wěn)定力度不均、消化過(guò)度 / 不足、碎片過(guò)多，活率波動(dòng)大，團(tuán)塊干擾后續(xù)上機(jī)。
3.重復(fù)性差、難復(fù)現(xiàn)人為操作差異大，同一組織不同人做，結(jié)果天差地別，文章數(shù)據(jù)難復(fù)現(xiàn)。
02、核心優(yōu)勢(shì)
一鍵自動(dòng)化：預(yù)設(shè)肝、肺等組織專(zhuān)用程序，放管→選程序→啟動(dòng)，全程自動(dòng)完成。
溫和解離：恒溫酶解 + 輕柔機(jī)械剪切，細(xì)胞活率更高、碎片更少。
結(jié)果穩(wěn)定：批次間一致性好，細(xì)胞得率與活率顯著提升，適配單細(xì)胞測(cè)序、流式、類(lèi)器官培養(yǎng)。
多組織通用：小鼠肝、肺、腫瘤、脾、腎等組織均可高效處理。
03、小鼠肝臟/肺臟單細(xì)胞制備
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：
試劑：專(zhuān)用消化酶、終止液、PBS、碎片去除劑
耗材：2 mL 消化管、100 μm 細(xì)胞濾網(wǎng)、離心管
儀器：全自動(dòng)單細(xì)胞懸液制備儀
標(biāo)準(zhǔn)流程：
1、連接儀器電源，打開(kāi)開(kāi)關(guān)，選好程序以備用。
2、消化酶和終止液提前用流動(dòng)自來(lái)水解凍，讓其混合更加均勻。
3、小鼠斷頸處死后，取出肝臟部，放入有PBS的培養(yǎng)皿中，放在冰上。
4、將選取的肝臟、肺臟組織用PBS洗滌后，用眼科剪剪碎、放入2ml消化管中，加入1ml左右消化酶。
5、放到模塊上，選擇對(duì)應(yīng)程序，點(diǎn)擊運(yùn)行開(kāi)始。
6、時(shí)間結(jié)束后儀器自動(dòng)停止。
7、用100um濾網(wǎng)過(guò)濾，加入終止液終止消化（消化液：終止液=1：1）
8、客戶(hù)要求未裂紅，加入500ulPBS+1ml碎片去除劑，離心后棄上清，然后洗細(xì)胞兩次。
9、最后加入少量無(wú)菌PBS打散混勻底部沉淀細(xì)胞，即可得到單細(xì)胞懸液。
小鼠肺（左）和小鼠肝臟（右）顯微鏡結(jié)果圖
04、適用場(chǎng)景全覆蓋
單細(xì)胞測(cè)序（scRNA-seq）、流式細(xì)胞術(shù)分析/分選、原代細(xì)胞分離與培養(yǎng)、類(lèi)器官構(gòu)建、腫瘤異質(zhì)性研究、免疫細(xì)胞、干細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)
05、總結(jié)
從組織塊→高質(zhì)量單細(xì)胞懸液，全自動(dòng)單細(xì)胞懸液制備儀真正做到：省時(shí)、省力、穩(wěn)活率、高重現(xiàn)尤其適合小鼠肝臟、肺臟等軟組織批量處理，讓新手也能穩(wěn)定做出合格樣本?？蒲胁粌?nèi)耗，從標(biāo)準(zhǔn)化單細(xì)胞制備開(kāi)始。
